{"id":1590,"date":"2025-12-16T23:15:31","date_gmt":"2025-12-16T23:15:31","guid":{"rendered":"https:\/\/www.unitec.edu\/conicieti\/?post_type=poster&#038;p=1590"},"modified":"2025-12-24T01:48:23","modified_gmt":"2025-12-24T01:48:23","slug":"estandarizacion-de-pcr-rflp-para-la-caracterizacion-molecular-de-genotipos-de-blastocystis-spp-en-muestras-de-heces-humanas","status":"publish","type":"poster","link":"https:\/\/www.unitec.edu\/conicieti\/es\/poster\/estandarizacion-de-pcr-rflp-para-la-caracterizacion-molecular-de-genotipos-de-blastocystis-spp-en-muestras-de-heces-humanas\/","title":{"rendered":"Estandarizaci\u00f3n de PCR-RFLP para la caracterizaci\u00f3n molecular de genotipos de Blastocystis spp. en muestras de heces humanas"},"content":{"rendered":"<h2>Antecedentes<\/h2>\n<p><em>Blastocystis spp.<\/em> es el \u00fanico <em>Stramenopile<\/em> que parasita el intestino humano. Se han identificado 17 subtipos (STs) en distintos hospederos, de los cuales del ST 1 al 9 se han encontrado en humanos, con o sin s\u00edntomas. Aunque su morfolog\u00eda es similar independientemente del hospedero y St, su diversidad gen\u00e9tica ha sido demostrada mediante T\u00e9cnicas de Biolog\u00eda Molecular. Estas t\u00e9cnicas deben ser estandarizadas para preservar la integridad del ADN, durante el proceso de extracci\u00f3n a partir de heces, para as\u00ed asegurar la genopificaci\u00f3n del par\u00e1sito.<\/p>\n<h2>Objetivo<\/h2>\n<p>Estandarizar la PCR-RFLP para la caracterizaci\u00f3n molecular de los subtipos de <em>Blastocystis spp.<\/em> en muestras de heces humanas.<\/p>\n<h2>Metodolog\u00eda<\/h2>\n<p><strong>63 muestras<\/strong><br \/>\n&#8211; 33 heces totales (HT), 22 heces lavadas (HL)<br \/>\n&#8211; 8 sedimentos cultivos de Boeck (CL)<\/p>\n<p><strong>Extracci\u00f3n de ADN:<\/strong><br \/>\n&#8211; Wizard\u00ae, Wizard Genomic\u00ae y DNAzol\u00ae, solos o combinados.<\/p>\n<p><strong>Evaluaci\u00f3n de la calidad del ADN<\/strong><br \/>\n&#8211; Pureza: 260\/280 Concentraci\u00f3n: 260 nm<br \/>\n&#8211; Contaminantes: 230 nm<\/p>\n<p><strong>PCR SSU 18S<\/strong><br \/>\n&#8211; 1780 pb y 310 pb (Sensibilidad y especificidad)<\/p>\n<p><strong>RFLP (1780 pb)<\/strong><br \/>\n&#8211; Hinf I, Rsa I (Yoshikawa et al., 2000)<\/p>\n<h2>Resultados<\/h2>\n<ul>\n<li>Se observ\u00f3 el mejor \u00edndice 260\/280 (alrededor de 2) y una absorbancia menor de 0,5 a 230 nm, al extraer el ADN a partir de CL, con el m\u00e9todo de Wizard\u00ae, solo o combinado.<\/li>\n<li>La PCR de 1780 pb tuvo una sensibilidad de 0,3125 ng\/\u03bcL de ADN y detect\u00f3 hasta 1 Blastocystis \/\u00b5L: La espec\u00edficidad fue del 62,5%, corregida por la especificidad del 100% de la PCR de 310 pb.<\/li>\n<li>La amplificaci\u00f3n por PCR de 1780 pb fue mayor (p&lt;0,001) en las CL (87,5%; 7\/8) y HL (68,2%;15\/22), con respecto a las HT (21,2%; 7\/33).<\/li>\n<li>Luego del RFLP de 20 amplificados, se obtuvo un 45% (9\/20) para el St1, un 30% (6\/20) para el St3, 10% (2\/20) para el St4 y un 15% de infecciones mixtas (3\/20).<\/li>\n<\/ul>\n<h2>Conclusiones\/Recomendaciones<\/h2>\n<p>El m\u00e9todo de extracci\u00f3n de Wizard\u00ae, con columna de s\u00edlica, permiti\u00f3 la obtenci\u00f3n de un ADN de mejor calidad, a partir de los CL y HL, ya que los procesos de lavado previos, a la extracci\u00f3n, favorecen la eliminaci\u00f3n de componentes que degradan la muestra de ADN y pueden inhibir la PCR.<\/p>\n<p>La estandarizaci\u00f3n del PCR-RFLP permite identificar los Sts de Blastocystis sp. del 1 al 4, en infecciones \u00fanicas o mixtas, facilitando su estudio epidemiol\u00f3gico molecular, en diferentes poblaciones humanas.<\/p>","protected":false},"featured_media":1591,"template":"template-poster-p2025.php","categories":[12],"colaboracion":[244,243],"investigador":[240,239,242,238,241],"tipo":[6],"class_list":["post-1590","poster","type-poster","status-publish","has-post-thumbnail","hentry","category-12","colaboracion-universidad-central-de-venezuela","colaboracion-universidad-latina-de-costa-rica","investigador-anaibeth-nessi","investigador-carmen-guzman","investigador-carolina-wagner","investigador-maria-vethencourt","investigador-monica-galindo","tipo-electronicos"],"acf":[],"yoast_head":"<!-- This site is optimized with the Yoast SEO plugin v26.2 - https:\/\/yoast.com\/wordpress\/plugins\/seo\/ -->\n<title>Estandarizaci\u00f3n de PCR-RFLP para la caracterizaci\u00f3n molecular de genotipos de Blastocystis spp. en muestras de heces humanas<\/title>\n<meta name=\"robots\" content=\"index, follow, max-snippet:-1, max-image-preview:large, max-video-preview:-1\" \/>\n<link rel=\"canonical\" href=\"https:\/\/www.unitec.edu\/conicieti\/es\/poster\/estandarizacion-de-pcr-rflp-para-la-caracterizacion-molecular-de-genotipos-de-blastocystis-spp-en-muestras-de-heces-humanas\/\" \/>\n<meta property=\"og:locale\" content=\"es_MX\" \/>\n<meta property=\"og:type\" content=\"article\" \/>\n<meta property=\"og:title\" content=\"Estandarizaci\u00f3n de PCR-RFLP para la caracterizaci\u00f3n molecular de genotipos de Blastocystis spp. en muestras de heces humanas\" \/>\n<meta property=\"og:description\" content=\"Antecedentes Blastocystis spp. es el \u00fanico Stramenopile que parasita el intestino humano. 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